Si è vero, scusate, posto di seguito la presentazione semi-completa, se vi saltano all’occhio altri difetti segnalateli pure, sono sempre contento di imparare.
Grazie
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\author[]{Peppo Peppisio \and Frengo Frenghisio}
\institute{Chimica Analitica Strumentale}
\logo{\includegraphics[width=16mm]{dna.jpg}}
\title[Speciazione del \textit{cis}-\texorpdfstring{\ce{Pt}}{Pt}]{\large
\only<1>{\textit{Speciation studies of \texttt{cis}-platin adducts with \textsc{DNA} nucleotides via elemental specific detection (\texorpdfstring{\ce{P} and \ce{Pt}}{P and Pt}) using liquid cromatography-inductively coupled plasma-mass spectrometry and structural characterization by electrospray mass spectrometry — by }}%
\only<2>{Studi di speciazione di addotti tra \texttt{cis}-platino e nucleotidi di \textsc{DNA} attraverso una rivelazione elemento specifica (\texorpdfstring{\ce{P} e \ce{Pt}}{P and Pt}) utilizzando \textsc{HPLC-ICP/MS} e caratterizzazione strutturale mediante \textsc{ESI/MS} — di }%
\textsc{Daniel Garcia Sar, Maria Montes-Bay\'{o}n, Elisa Blanco Gonz\'{a}lez and Alfredo Sanz-Medel}}
\date{}
\begin{document}
\begin{frame}
\maketitle
\end{frame}
\section{Introduzione}
\begin{frame}
\frametitle{Il funzionamento}
\begin{columns}[c]
\column{0.45\textwidth}
\begin{minipage}{\columnwidth}
\centering
\only<1-2>{\includegraphics[width=1\columnwidth]{CisPt}}%
\only<3-4>{\begin{exampleblock}{Dati conosciuti}%
\begin{itemize}
\item Sostituzione di leganti in più stadi
\item Legame con residui di guanina consecutivi
\end{itemize}
\end{exampleblock}}
\end{minipage}
\column{0.45\textwidth}
\begin{minipage}{\columnwidth}
\centering
\only<2>{\includegraphics[width=1\columnwidth]{G}}%
\only<4>{\begin{alertblock}{Potenzialità del metodo}%
\begin{itemize}
\item Quantificazione e caratterizzazione dei prodotti
\item Misure cinetiche \texttt{in vivo}
\end{itemize}
\end{alertblock}}%
\end{minipage}
\end{columns}
\end{frame}
\begin{frame}
\frametitle{Tecniche utilizzabili}
\begin{columns}[c]
\column{0.60\columnwidth}
\LARGE
\begin{itemize}
\item <1> \textsc{COMET}
\item <1> \textsc{TUNEL}
\item <1-3>\textsc{HPLC-ICP/MS}
\item <1> Conteggio Micronuclei
\item <1-2> Marcatura con \ce{^{32}P}
\end{itemize}
\column{0.40\columnwidth}
\centering
\only<1>{\includegraphics[width=1\columnwidth]{brimo.png}}%
\only<2>{\includegraphics[width=1\columnwidth]{becondo.png}}%
\only<3>{\includegraphics[width=1\columnwidth]{berzo.png}}%
\end{columns}
\end{frame}
\section{Preparative}
\begin{frame}
\frametitle{Preparative a confronto}
\begin{primo}{\texttt{cis}-\texorpdfstring{\ce{Pt}}{Pt} con nucleotidi}
\begin{itemize}
\small
\item Miscela di mononucleotidi a \unit{10}{\milli\gram\per\milli\liter} con \unit{0,5}{\milli\gram\per\milli\liter} di \texttt{cis}-\ce{Pt}
\item Incubazione per \unit{24}{\hour} a \unit{37}{\celsius}
\end{itemize}
\end{primo}
\pause
\begin{secondo}{\texttt{cis}-\texorpdfstring{\ce{Pt}}{Pt} con oligonucleotide}
\begin{itemize}
\small
\item Oligonucleotide 5'-TCCGGTCC-3' con \texttt{cis}-\ce{Pt}
\item Incubazione per \unit{24}{\hour} a \unit{37}{\celsius}
\item Idrolisi con Nucleasi S1
\item Incubazione per \unit{14}{\hour} a \unit{45}{\celsius}
\item Rimozione dell'enzima per filtrazione
\end{itemize}
\end{secondo}
\pause
\begin{terzo}{\texttt{cis}-\texorpdfstring{\ce{Pt}}{Pt} con \textsc{DNA}}
\begin{itemize}
\small
\item Denaturazione termica del \textsc{DNA}
\item Stessa procedura vista sopra
\end{itemize}
\end{terzo}
\end{frame}
\section{Strumentazione}
\begin{frame}
\frametitle{Parametri \textsc{HPLC}}
\begin{columns}[c]
\column{0.5\textwidth}
\only{\begin{alertblock}{Colonna Discovery $C_{16}-amide$}
\begin{itemize}
\footnotesize
\item Maggiore polarità a causa di gruppi ammidici
\item Non consigliata per analisi in \textsc{LC-MS}
\end{itemize}
\end{alertblock}
\begin{center}
\includegraphics[width=1\columnwidth]{Colonnamale}
\end{center}}<1-2>
\column{0.45\textwidth}
\only{\begin{exampleblock}{Colonna $C_{8} Narrow-Bore$}
\begin{itemize}
\footnotesize
\item Minore polarità
\item Basso flusso cromatografico
\end{itemize}
\end{exampleblock}
\bigskip
\bigskip
\bigskip
\medskip
\smallskip
\begin{center}
\includegraphics[width=1\columnwidth]{Colonnabuona}<2>
\end{center}}<2>
\end{columns}
\end{frame}
\begin{frame}
\frametitle{Parametri \textsc{HPLC}}
\begin{center}
\begin{minipage}[c]{0.5\textwidth}
\bigskip
\begin{exampleblock}{Colonna $C_{8} Narrow-Bore$}
\begin{itemize}
\footnotesize
\item Minore polarità
\item Basso flusso cromatografico
\end{itemize}
\end{exampleblock}
\end{minipage}
\end{center}
\begin{center}
\small
\pause
\begin{tabular}{cc}
\toprule & Parametri ottimizzati \\
\midrule
Colonna a fase inversa & $C_8$ \unit{5}{\micro\meter}(\unit{250 x 2,1}{\milli\meter} id, Alltech Alltima) \\
Fase mobile & \ce{Ac^{-}NH3+} \unit{60}{\milli M} (pH=5,8) 7,5\% \ce{MeOH} \\
Volume d'iniezione & \unit{20}{\micro\liter} \\
Flusso & \unit{0,2}{\milli\liter\per\minute} \\
\bottomrule
\end{tabular}
\end{center}
\pause
\textcolor{red}{$\Rightarrow$ Interfacciamento con micro-nebulizzatore pneumatico (\textsc{PFA})}
\end{frame}
\begin{frame}
\frametitle{Parametri \textsc{ICP-MS}}
\begin{alertblock}{La problematica strumentale}
\begin{itemize}
\item Alto potenziale di ionizzazione per \ce{^{31}P}
\pause
\item Bassa percentuale di ioni prodotti
\pause
\item Bassa sensibilità
\pause
\item Interferenze poliatomiche (\ce{^{15}N^{16}O^{+}}, \ce{^{14}N^{16}O^{1}H^{+}})
\end{itemize}
\end{alertblock}
\begin{center}
\small
\pause
\begin{tabular}{cc}
\toprule
& Parametri ottimizzati \\
\midrule
Potenza del plasma & \unit{1500}{\watt} \\
Flusso principale & \unit{15}{\liter\per\minute} \\
Flusso di trasporto & \unit{1,1}{\liter\per\minute} \\
Isotopi monitorati & \ce{^{31}P},\ce{^{195}Pt}\\
QP-bias & \unit{-11}{\volt} \\
Octapole-bias & \unit{-13}{\volt} \\
Extraction & \unit{-3,5}{\volt} \\
\bottomrule
\end{tabular}
\end{center}
\end{frame}
\section[Risultati]{Risultati Ottenuti}
\begin{frame}
\frametitle{I Cromatogrammi}
\centering
\begin{minipage}[c]{0.5\textwidth}
\begin{primo}{\texttt{cis}-\ce{Pt} con nucleotidi}
\only<1>{\includegraphics[width = .28\paperwidth]{Connucleotidi}}%
\only<2>{\includegraphics[width = .37\paperwidth]{nucleotidiesi}}%
\only<3>{\includegraphics[width = .28\paperwidth]{Connucleotidifor}}%
\end{primo}
\end{minipage}
\centering
\begin{minipage}[c]{0.5\textwidth}
\begin{secondo}{\texttt{cis}-\ce{Pt} con oligonucleotide}
\only<1>{\includegraphics[width = .28\paperwidth]{Conoligopeptide}}%
\only<2>{\includegraphics[width = .37\paperwidth]{oligopeptidespettro}}%
\only<3>{\includegraphics[width = .28\paperwidth]{Conoligopeptidefor}}%
\end{secondo}
\end{minipage}
\end{frame}
\begin{frame}
\frametitle{I Cromatogrammi}
\begin{center}
\begin{minipage}[c]{0.5\textwidth}
\begin{terzo}{\texttt{cis}-\ce{Pt} con \textsc{DNA}}
\includegraphics[width = .32\paperwidth]{Finale}
\end{terzo}
\end{minipage}
\end{center}
\end{frame}
\section{Conclusioni}
\begin{frame}
\frametitle{Conclusioni}
\begin{center}
\begin{minipage}[c]{1\textwidth}
\begin{exampleblock}{Vantaggi del metodo}
\begin{itemize}
\item Buona accuratezza stimata (E \% = 8,5) su \ce{^{31}P}
\item Buona precisione (\textsc{RSD} \% = 4,9) su \ce{^{31}P}
\item Separazione efficiente ed ottimizzata
\item Facile identificazione e caratterizzazione degli addotti
\item Metodo relativamente semplice
\end{itemize}
\end{exampleblock}
\end{minipage}
\pause
\begin{minipage}[c]{1\textwidth}
\begin{alertblock}{Lacune del metodo}
\begin{itemize}
\item Mancanza di titolo noto, con incertezza, dell'oligopeptide
\item Assenza di figure di merito sulla quantificazione del \ce{^{195}Pt}
\item Mancanza di applicazione a matrici reali
\end{itemize}
\end{alertblock}
\end{minipage}
\end{center}
\end{frame}
\end{document}
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